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轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62試劑盒(熒光-PCR法)

簡(jiǎn)要描述:轉(zhuǎn)基因水稻試劑盒(熒光產(chǎn)品特點(diǎn):1、靈敏度高,抗污染能力強(qiáng),定量準(zhǔn)確,重復(fù)性好;2、樣本處理與PCR擴(kuò)增在同一個(gè)PCR反應(yīng)管中即可完成;3、無(wú)需加熱
產(chǎn)品說(shuō)明:1.高便捷性。 2.靈敏度高。 3.特異性強(qiáng)。 4.精密性好。 5.結(jié)果準(zhǔn)確可靠。 6.嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
結(jié)構(gòu)及組成:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)液(PCR反應(yīng)液)、RNA
本試劑盒適用于動(dòng)物組織以及食品、飼料等樣本中綿羊CYTB基因的檢測(cè)

  • 產(chǎn)  地:上海
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間:2024-08-26
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:4252

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌貨號(hào)HXG744
規(guī)格50T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研使用應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)

         轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62試劑盒(熒光-PCR法)

通用名稱(chēng):轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62試劑盒(熒光-PCR法)

Name   LLRICE62 derived ingredients Detection Kit(Real-Time PCR Method)

【包裝規(guī)格】50T/盒

【檢驗(yàn)原理】本試劑盒采用TaqMan探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光PCR技術(shù),設(shè)計(jì)一對(duì)馬源性成分(Horse)保守區(qū)特異性引物結(jié)合一條特異性探針,用熒光PCR技術(shù)對(duì)馬源性成分(Horse)保守區(qū)的DNA進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),從而達(dá)到快速檢測(cè)之目的。

轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62試劑盒(熒光-PCR法)【試劑組成】

稱(chēng)

規(guī)

酶液

50μL×1 管

Horse反應(yīng)液

500μL×2 管

Horse陽(yáng)性質(zhì)控品

50μl ×1 管

陰性質(zhì)控品

250μl×1 管

注:

1) 不同批號(hào)試劑不能混用。

2) 試劑盒內(nèi)各試劑組份足夠包裝規(guī)格所標(biāo)示的檢測(cè)次數(shù)。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過(guò) 5 次。有效期 12 個(gè)月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycleBio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。

【標(biāo)本采集】取動(dòng)物組織及其制品、食品或飼料約 1g。

【保存和運(yùn)輸】上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,長(zhǎng)期保存可置-70℃。但不能超過(guò) 6 個(gè)月,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2-8℃冰袋運(yùn)輸

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

取動(dòng)物組織及其制品、食品或飼料約 1g,剪碎混勻后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理鹽水后繼續(xù)研磨,待勻漿后轉(zhuǎn)至 1.5mL 滅菌離心管中, 8000rpm 離心 2min,取上清液 100μL 1.5mL 滅菌離心管中。

1.2 核酸提取

1.3 提取采用提取或試劑磁珠法或離心柱法,請(qǐng)嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2. 試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))

根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù),設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照;樣品每滿(mǎn) 10份,多配制 1 份),每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:

步驟

循環(huán)數(shù)

溫度

時(shí)間

收集熒光信號(hào)

1

1 cycle

95℃

10min

2

40 cycles

94℃

15sec

55℃

30sec

5. 結(jié)果分析判定

  • 結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,當(dāng)曲線(xiàn)出現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline start (一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop (一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),以及 Threshold Value (上下拖動(dòng)閾值線(xiàn)至高于陰性對(duì)照),重新分析結(jié)果。

5.2 判斷

a) 檢測(cè)通道 Ct 35,有 FAM 熒光信號(hào)檢出,并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線(xiàn),判斷樣品為陽(yáng)性。

b) 當(dāng) 30<Ct ≤35 時(shí),且有典型的擴(kuò)增曲線(xiàn)時(shí),則需重復(fù)實(shí)驗(yàn)。再次擴(kuò)增后檢測(cè)體系的Ct 值仍≤35,且有典型的擴(kuò)增曲線(xiàn),則判定該樣品含有相應(yīng)的動(dòng)物源性成分。當(dāng)再次擴(kuò)增后,檢測(cè)體系 Ct 值>35,或無(wú)典型的擴(kuò)增曲線(xiàn),則判定該樣品不含相應(yīng)的動(dòng)物源性成分。

6. 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

a) 空白對(duì)照:無(wú)FAM 熒光信號(hào)檢出或 Ct ≥35,未出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線(xiàn)。

b) 陰性對(duì)照:無(wú)FAM 熒光信號(hào)檢出或 Ct ≥35,未出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線(xiàn)。

c) 陽(yáng)性對(duì)照:有 FAM 熒光信號(hào)檢出,并出現(xiàn)典型的擴(kuò)增曲線(xiàn),Ct 值<30。

d) 以上應(yīng)同時(shí)滿(mǎn)足,否則本次實(shí)驗(yàn)無(wú)效。

轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62試劑盒(熒光-PCR法)【注意事項(xiàng)】

? 所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行;檢驗(yàn)過(guò)程中,參照《GB/T 27403 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品分子生物學(xué)檢測(cè)》的規(guī)定進(jìn)行。

? 試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,混勻并短暫離心;

? 反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

? 反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

? 使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)工作服;

? 樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;

? 實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;

? 試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全   通則》進(jìn)行處理。

.

滬崢PCR優(yōu)勢(shì):

   1.   特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保
所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)。

   2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證。

   3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。

   4.   實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。

 

P CR實(shí)驗(yàn)概述



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